Tema 2 - Estructura y función de ácidos nucleicos
Tipos de ácidos nucleicos y composición
¿Cómo describimos cualquier biomolécula?
- Composición
- Estructura química »»propiedades
- Estructura tridimensional
»»propiedades
- forma ::: conformación
- tamaño ::: dimensiones
Composición elemental de los ácidos nucleicos: C H O N P, no S
Composición química de los ácidos nucleicos:
- nucleótidos (monómeros)
- ⇒ Dos tipos de ácidos nucleicos: DNA, RNA
Ubicación y función de los ácidos nucleicos:
- DNA
- eucariotas: en núcleo, matriz mitocondrial y estroma del cloroplasto
- procariotas: zona nucleoide
- algunos virus: dentro de la cápsida
- es el material genético (depositario y transmisor de la información genética)
- RNA
- eucariotas: en citosol, matriz mitocondrial y estroma del cloroplasto
- procariotas: citosol
- otros virus: dentro de la cápsida
- interviene en la expresión de la información genética
- es el material genético de virus
Componentes de los ácidos nucleicos:
- ácido nucleico = polinucleótido (polímero)
- monómeros: nucleótidos
Componentes de un nucleótido:
- parte ácida - fosfato(s) ; nomenclatura (fosfato, bisfosfato, fosfodiéster, difosfato, trifosfato), ionización
- parte neutra - azúcar, monosacárido, pentosa
- parte básica - base nitrogenada
Nucleótidos componentes de cada tipo de ácido nucleico y otros nucleótidos con distinta función.
Nomenclatura:
abreviatura común: |
A |
G |
U |
T |
C |
base: |
adenina |
guanina |
uracilo |
timina |
citosina |
nucleósido: |
adenosina |
guanosina |
uridina |
timidina |
citidina |
nucleótido:
(nucleósido-monofosfato, NMP) |
adenilato,
ác. adenílico,
AMP
|
guanilato,
ác. guanílico,
GMP |
uridilato,
ác. uridílico,
UMP |
timidilato,
ác. timidílico,
TMP |
citidilato,
ác. citidílico,
CMP |
(y sus formas desoxi-) |
dAMP |
dGMP |
dUMP |
dTMP |
dCMP |
Estructura de los ácidos nucleicos
¿Cómo la estudiamos? En "niveles estructurales"
- E. primaria: covalente, enlace entre monómeros + orden de éstos (="secuencia")
- E. secundaria: conformación local, interacción no covalente, emparejamiento de cadenas (hebras) (DNA ≠ RNA)
- E. de orden superior: plegamiento en el espacio, interacción no covalente (DNA ≠ RNA)
RNA tiene e. terciaria
Estructura primaria
- descripción; enlace fosfodiéster
- escritura de secuencias
Estructura secundaria: la doble hélice
en DNA: “forma B”, modelo estructural de Watson y Crick,
forma fisiológica
- Comprensión de su fundamento a partir de la estructura de los nucleótidos
- Complementariedad de bases, complementariedad de cadenas: moléculas bicatenarias
- modelos 3D de la estructura, en Biomodel-1: DNA
- Morfología de la doble hélice; consecuencias para las propiedades del DNA
- Fuerzas que estabilizan la doble hélice:
- enlaces de hidrógeno intercatenarios
- efecto hidrófobo (interior apolar, exterior polar)
- fuerzas de apilamiento de las bases (Van der Waals)
en RNA: sólo localmente e intracatenaria (monocatenario)
- modelos 3D de la estructura, en Biomodel-1: RNA
Resumen comparado entre DNA y RNA:
|
DNA |
RNA |
componentes |
desoxirribosa
AGTC únicamente |
ribosa
AGUC y otros minoritarios |
estructura primaria |
es idéntica en ambos |
estructura secundaria |
Toda la molécula asociada con otra cadena.
Bicatenario
Doble hélice generalizada. |
Sólo en zonas de la molécula.
Monocatenario
Tramos locales de doble hélice corta. |
estructura terciaria |
no |
sí tiene |
Estudio de los ácidos nucleicos en el laboratorio
Texto ilustrado e interactivo de biología molecular, cap.3.5
Propiedades de los ácidos nucleicos en disolución
- Hidrófilos
- Ácidos, pKa≈2
- Polianiónicos
- Disoluciones viscosas (moléculas muy alargadas)
Propiedades físicas: absorción de luz ultravioleta
- simulador (en Biomodel, Laboratorios virtuales)
- complemento web 3.1
Propiedades químicas: hidrólisis
- efecto de ácidos y álcalis sobre los enlaces fosfodiéster y N-glicosídico
- diferencia entre DNA y RNA
Efecto del calentamiento y del pH: desnaturalización de los ácidos nucleicos
- Separación de hebras, pérdida de estructura secundaria
- Agentes desnaturalizantes:
temperatura, pH, urea, formamida, formaldehído, guanidinio...
- Detección:
aumento de A260 (efecto hipercrómico),
disminución de viscosidad
- Posible renaturalización al retirar lentamente el agente
Secuenciación del DNA
- Método clásico: de Sanger o de didesoxinucleótidos
- Se sintetiza una hebra complementaria de DNA pero se interrumpe al llegar el didesoxinucleótido
- Se marca el extremo interrumpido (usando 4 flurocromos en los 4 ddNTP)
- Se separan las moléculas de DNA por tamaño y se detecta su color
- Tamaño »» longitud »» distancia al comienzo »» secuencia
Tipos de RNA: estructuras y funciones
RNA mensajero, mRNA
- monocatenario
- copia del mensaje de una hebra de un segmento del DNA
- secuencia complementaria
- tamaño variado (mensaje)
- poca o nula estructura secundaria
- función: aporta la información para la síntesis de una proteína (secuencia de nt
secuencia de aminoácidos)
RNA ribosómico, rRNA
estructura secundaria y terciaria de dos rRNA bacterianos
- monocatenario
- componente de los ribosomas (65% de la masa)
- varios tamaños, siempre los mismos (de 120 a 4700 nt)
- eucariotas: 4 tipos de rRNA: 5S, 5’8S, 18S y 28S
- procariotas: 3 tipos: 5S, 16S y 23S
- Bastante estructura secundaria
- Estructura terciaria definida
- Función:
- estructura del ribosoma
- catálisis en la síntesis de proteínas, forma el enlace peptídico
RNA transferente, tRNA
estructura secundaria de los tRNA
|
estructura terciaria de los tRNA
|
- monocatenario
- activa los aminoácidos para llevarlos al ribosoma
- tamaño pequeño y poco variado (~75 nt)
- Bastante estructura secundaria
- Estructura terciaria definida
- Función:
- transporta los aminoácidos, permite que se coloquen correctamente en el ribosoma
- define su orden de incorporación a la proteína porque se empareja con el mRNA
- es grupo activador de los aminoácidos para que formen el enlace peptídico
RNA no codificantes
- nucleares pequeños (snRNA)
- participan en la formación de los mRNA y otros RNA eucarióticos
- microRNA (miRNA)
- 22 nt
- participan en la regulación de la expresión de los mRNA: su vida media y su uso en la traducción
- RNA interferentes (iRNA)
- en regulación de la expresión de los mRNA
- RNA mitocondriales (mensajeros, transferentes y ribosómicos)
- RNA del cloroplasto (ídem)
.